什么是cdna文库?如何构建?
编辑:自学文库
时间:2024年03月09日
首先,总RNA需要被酶逆转录为cDNA,其中的mRNA会被逆转录酶合成相应的cDNA。
然后,通过添加寡核苷酸引物和dNTPs,进一步合成第二链cDNA。
接下来,通过使用DNA聚合酶 I 和T4 DNA连接酶,将接头序列添加到cDNA的末端。
随后,将构建的cDNA连接到合适的载体上,如质粒或噬菌体。
最后,通过转化或包装,将构建的文库引入宿主细胞中。