什么是cdna文库?如何构建?

编辑:自学文库 时间:2024年03月09日
CDNA文库是通过将组织或细胞中的RNA反转录为其相应的DNA复制物,并将其插入到适当的载体中而构建的。
  首先,总RNA需要被酶逆转录为cDNA,其中的mRNA会被逆转录酶合成相应的cDNA。
  然后,通过添加寡核苷酸引物和dNTPs,进一步合成第二链cDNA。
  接下来,通过使用DNA聚合酶 I 和T4 DNA连接酶,将接头序列添加到cDNA的末端。
  随后,将构建的cDNA连接到合适的载体上,如质粒或噬菌体。
  最后,通过转化或包装,将构建的文库引入宿主细胞中。