固定的目的是保持细胞和组织的形态结构，防止其在染色和观察过程中的变形和脱落。
同时，固定还能保持样本的抗原性，提高染色的稳定性和灵敏度。
固定冰冻切片的常用方法包括冷冻乙醇固定、酸性酒精固定和甲醛固定等。
具体应选择哪种方法，取决于被研究的细胞或组织的性质以及所需的染色试剂。
在固定前，切片应先经过预冷处理，以保持细胞和组织的完整性。
然后，在固定前要迅速将切片浸入固定液中，尽量避免气泡的产生。
固定时间一般为10-30分钟，但也可根据具体实验要求进行调整。
值得注意的是，过长的固定时间可能导致细胞和组织的染色质丧失或变性，从而影响染色效果。
因此，在固定过程中应严格控制时间，并在固定后将切片迅速转移至洗涤缓冲液中，以去除多余的固定剂。
综上所述，固定冰冻切片是免疫组化的重要步骤，能够保持样本的形态结构和抗原性，提高染色的稳定性和灵敏度。
因此，在进行免疫组化实验时，我们通常需要对冰冻切片进行固定处理。